植物中天然乙酰胆碱酯酶抑制剂的高通量发现研究

	植物中天然乙酰胆碱酯酶抑制剂的高通量发现研究
项目编号	20802031
	杨中铎
摘要	本项目通过研究新型酶反应底物、显色剂以及改进现有方法的手段，建立了两种高通量、低费用的薄层色谱生物自显影方法用于天然乙酰胆碱酯酶抑制剂的识别和跟踪分离研究。新方法解决了现有方法中存在的酶用量大、薄层背景不明显不利于观察的问题。具有费用低、灵敏度高的优点。利用新方法，对常用中药、藏药和西北分布较广的贝母属、锦鸡儿属、杜鹃属植物以及植物内生菌中存在的天然乙酰胆碱酯酶抑制剂进行快速寻找和跟踪分离，发现了7个较高活性的先导化合物（2-羟基-1-甲氧基阿朴啡、geissoschizinemethylether、茵芋碱、康丝碱，锥丝明，康丝瑞明，锥丝亚胺）。对部分活性化合物进行了与酶的计算机分子模拟对接研究。研究了其中的一个先导物-荷叶碱（2-羟基-1-甲氧基阿朴啡衍生物）的构效关系。三年来共发表论文20篇，其中SCI收录10篇；申请国家发明专利3项，其中2项已授权。本项目是快速寻找天然先导物的新思路，也为今后开展其它类酶抑制剂的研究提供了借鉴。建立的新薄层色谱生物自显影方法，为研究经费不足的研究者从事乙酰胆碱酯酶抑制剂的发现研究提供了捷径。【英文摘要】Twohigh-throughput,low-costthin-layerchromatographic(TLC)bioautographicmethodsforscreeningnaturalacetylcholinesterase(AchE)inhibitorsfromplantshavebeenestablishedbystudyingnewsubstrateoftheenzymereaction,newchromogenicagentandimprovingexistingmethods.Theproblemsofthehighconsumptionofenzymeandlight-coloredbackgroundofTLCplateindocumentedmethodshavebeensolvedinnewmethods.Newmethodshavelow-cost,highsensitiveadvantages.Sevenhighactiveleadcompounds(2-hydroxy-1-methoxyaporphine,geissoschizinemethylether,skimmianine,conessine,conessimine,conarrhimine,conimine)havebeenobtainedbybioactivity-guidedchromatographicfractionationoftotalalkaloidalextractsofTraditionalChinesemedicine,TibetanmedicineandextractsofFritillaria,Caragana,Rhododendrongenus.ValiddockingprogramwasappliedtopredictthepossiblebindingmodeofsomeleadcompoundswithAchE.Thestructure-activityrelationshipofnuciferine(oneofthenew-foundleadcompounds)havealsobeenstudied.Inthepastthreeyears,atotalof20papers,including10SCIhavebeenpublishedandthreenationalinventionpatentshavebeenapplied,twoofwhichhavebeenauthorized.Thisprojectisanewideaforquicklyfindleadcompoundsfromnaturalresources.ThesuccessfulexperiencesobtainedfromthisprojectmaybehelpfulforconstructingnewTLC-bioautographicmethodsforscreeningotherenzymeinhibitors.OurnewTLC-bioautographicmethodswillbebenefittoresearchgroupslackingenoughfundspursuingfornaturalacetylcholinesteraseinhibitors. 【结题摘要】本项目通过研究新型酶反应底物、显色剂以及改进现有方法的手段，建立了两种高通量、低费用的薄层色谱生物自显影方法用于天然乙酰胆碱酯酶抑制剂的识别和跟踪分离研究。新方法解决了现有方法中存在的酶用量大、薄层背景不明显不利于观察的问题。具有费用低、灵敏度高的优点。利用新方法，对常用中药、藏药和西北分布较广的贝母属、锦鸡儿属、杜鹃属植物以及植物内生菌中存在的天然乙酰胆碱酯酶抑制剂进行快速寻找和跟踪分离，发现了7个较高活性的先导化合物（2-羟基-1-甲氧基阿朴啡、geissoschizinemethylether、茵芋碱、康丝碱，锥丝明，康丝瑞明，锥丝亚胺）。对部分活性化合物进行了与酶的计算机分子模拟对接研究。研究了其中的一个先导物-荷叶碱（2-羟基-1-甲氧基阿朴啡衍生物）的构效关系。三年来共发表论文20篇，其中SCI收录10篇；申请国家发明专利3项，其中2项已授权。本项目是快速寻找天然先导物的新思路，也为今后开展其它类酶抑制剂的研究提供了借鉴。建立的新薄层色谱生物自显影方法，为研究经费不足的研究者从事乙酰胆碱酯酶抑制剂的发现研究提供了捷径。
项目类别	青年科学基金项目
项目来源	国家自然科学基金
	2009
结束日期	2011-12-31
学科门类	05 - 化学科学 ; 0501 - 合成化学
主持机构	兰州理工大学
项目经费	180000.0
国家	CN
语种	中文
文献类型	项目
条目标识符	https://ir.lut.edu.cn/handle/2XXMBERH/64978
专题	生命科学与工程学院
推荐引用方式 GB/T 7714	杨中铎.植物中天然乙酰胆碱酯酶抑制剂的高通量发现研究.2009.