Lanzhou University of Technology Institutional Repository (LUT_IR)
题名 | 人胰岛素单链抗体和HRP或EGFP重组蛋白的设计、克隆及酵母表达 |
作者 | 秦健宇 |
学位类型 | 硕士 |
导师 | 马建忠 |
答辩日期 | 2014 |
学位授予单位 | 兰州理工大学 |
学位名称 | 理学硕士 |
学位专业 | 生物化学与分子生物学 |
关键词 | 人胰岛素单链抗体 绿色荧光蛋白 辣根过氧化物酶 pGAPZαA 酵母表达 串联质谱 免疫印迹 |
摘要 | 本论文针对目前临床检测胰岛素方法在操作过程中的步骤多、耗时长、难以高通量进行的ELISA方法,设计、合成、克隆基于人胰岛素单克隆抗体的单链抗体(scFv)基因、增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因和辣根过氧化物酶(HRP)基因并构建编码重组融合蛋白的基因——单链人胰岛素抗体和增强绿色荧光蛋白(scFv-EGFP)基因和单链人胰岛素抗体和辣根过氧化物酶(scFv-HRP)基因并实现在酵母细胞中诱导表达,得到两个可以识别、结合样品中的胰岛素的双功能重组融合蛋白,为临床上取代ELISA的方法提供研究基础。 |
其他摘要 | To design,synthesize and clone single chain human insulin antibody gene (scFv) which was based on human insulin monoclonal antibody,enhance green fluorescent protein gene (EGFP) and horseradish peroxidase gene(HRP).And then the fusion protein scFv-EGFP gene and scFv-HRP gene were constructed and expressed by Pichia pastoris cells and then two bifunctional recombinant fusion proteins were obtained,which could recognize and bind insulin in the sample,which were providing the basis for the method of clinically replacing ELISA. |
页数 | 90 |
语种 | 中文 |
学号 | 142071010002 |
文献类型 | 学位论文 |
条目标识符 | https://ir.lut.edu.cn/handle/2XXMBERH/102885 |
专题 | 兰州理工大学 |
作者单位 | 兰州理工大学 |
第一作者单位 | 兰州理工大学 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 秦健宇. 人胰岛素单链抗体和HRP或EGFP重组蛋白的设计、克隆及酵母表达[D]. 兰州理工大学,2014. |
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