牛病毒性腹泻病毒Core蛋白的原核表达及多克隆抗体制备
张康1; 张璇2; 闫遵祥1; 王磊1; 张凯1; 张景艳1; 罗永江1; 仇正英1; 薛欢3; 李建喜1
2019
Source Publication浙江农业学报
ISSN1004-1524
Volume31Issue:11Pages:1819-1824
Abstract为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的Core蛋白及其多克隆抗体,根据Core蛋白的编码基因序列,设计合成一对特异性引物,利用RT-PCR扩增BVDV Core基因并定向插入Pet30a载体中,构建重组质粒Pet30a-Core,经酶切鉴定后转化大肠埃希菌TOP 10感受态细胞,筛选获得阳性重组菌,以IPTG进行诱导后成功表达出分子质量为20 ku的重组Core蛋白。将诱导表达的蛋白产物经融合蛋白的Ni柱亲和法进行纯化,利用纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,并利用间接ELISA法测出多克隆抗体效价达到1∶512 000。蛋白质印迹法(Western blot)和间接免疫荧光试验(IFA)证实,多克隆抗体可与细胞中的BVDV抗原发生反应,具有良好的免疫原性和特异性。本实验成功制备了BVDV重组Core蛋白的兔源多克隆抗体,为BVDV的检测及其Core蛋白功能研究奠定了基础。
Keyword牛病毒性腹泻病毒 Core蛋白 表达 多克隆抗体
Indexed ByCSCD
Language中文
WOS Research AreaAgriculture
WOS SubjectAGRICULTURE MULTIDISCIPLINARY
CSCD IDCSCD:6633167
Document Type期刊论文
Identifierhttp://ir.lut.edu.cn/handle/2XXMBERH/75605
Collection个人在本单位外知识产出
Affiliation1.中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所, 农业农村部兽用药物创新重点实验室;;甘肃省新兽药工程重点实验室, 兰州, 甘肃 730050, 中国
2.兰州理工大学生命科学与工程学院, 兰州, 甘肃 730050, 中国
3.西安交通大学基础医学院, 西安, 陕西 710061, 中国
Recommended Citation
GB/T 7714
张康,张璇,闫遵祥,等. 牛病毒性腹泻病毒Core蛋白的原核表达及多克隆抗体制备[J]. 浙江农业学报,2019,31(11):1819-1824.
APA 张康.,张璇.,闫遵祥.,王磊.,张凯.,...&李建喜.(2019).牛病毒性腹泻病毒Core蛋白的原核表达及多克隆抗体制备.浙江农业学报,31(11),1819-1824.
MLA 张康,et al."牛病毒性腹泻病毒Core蛋白的原核表达及多克隆抗体制备".浙江农业学报 31.11(2019):1819-1824.
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