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| Tollip敲除猪肾细胞系的构建 | |
王家丽1,2; 杨帆1,3 ; 邵文华1; 黄梦瑶1; 曹伟军1,3; 蒲秀瑛2; 张伟1,3; 郑海学1,2,3
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| 2024-02-23 | |
| 发表期刊 | 畜牧兽医学报
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| ISSN | 0366-6964 |
| 页码 | 1-14 |
| 摘要 | 为了探究Toll作用蛋白（toll-interacting protein， Tollip）对口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus， FMDV）增殖的影响，利用CRISPR/Cas9 基因编辑技术构建Tollip基因缺失的猪肾细胞系（PK-15），并通过PCR测序和Western blot确认敲除效果，然后利用CCK-8试剂盒测定Tollip缺失后细胞活力变化，确认敲除细胞与野生细胞无显著差异，用FMDV感染敲除细胞后，采用Western blot、间接免疫荧光、实时荧光定量和病毒滴度测定等方法测定病毒在敲除细胞系中复制情况。结果显示：感染FMDV后，敲除细胞与野生细胞相比，显著促进了病毒的复制。综上，在PK-15细胞上，成功构建Tollip缺失细胞系，且试验表明Tollip的缺失有助于FMDV的复制。研究结果为后续Tollip功能研究及抗病毒机制研究提供理论依据。 |
| 关键词 | CRISPR/Cas9 Tollip基因 细胞系 口蹄疫病毒 |
| URL | 查看原文 |
| 收录类别 | 北大核心 ; CSCD |
| 语种 | 中文 |
| 资助项目 | 国家自然科学基金项目（32102639;32072831）;国家重点研发计划项目（2021YFD1800300）;甘肃省杰出青年基金（21JR7RA026）;兰州大学中央高校基本科研业务费专项资金（lzujbky-2022-ey20）;甘肃省科技重大专项（22ZD6NA001）;国家生猪产业技术体系（CARS-35） |
| 中图分类号 | S852.65 |
| 原始文献类型 | 学术期刊 |
| 引用统计 | |
| 文献类型 | 期刊论文 |
| 条目标识符 | https://ir.lut.edu.cn/handle/2XXMBERH/169761 |
| 专题 | 理学院 生命科学与工程学院 外国语学院 |
| 通讯作者 | 张伟; 郑海学 |
| 作者单位 | 1.中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室国家口蹄疫参考实验室; 2.兰州理工大学生命科学与工程学院; 3.甘肃省病原生物学基础学科研究中心 |
| 第一作者单位 | 生命科学与工程学院 |
| 通讯作者单位 | 生命科学与工程学院 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 王家丽,杨帆,邵文华,等. Tollip敲除猪肾细胞系的构建[J]. 畜牧兽医学报,2024:1-14. |
| APA | 王家丽.,杨帆.,邵文华.,黄梦瑶.,曹伟军.,...&郑海学.(2024).Tollip敲除猪肾细胞系的构建.畜牧兽医学报,1-14. |
| MLA | 王家丽,et al."Tollip敲除猪肾细胞系的构建".畜牧兽医学报 (2024):1-14. |
| 条目包含的文件 | 条目无相关文件。 | |||||
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